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簡要描述:PCR試劑盒用于常規(guī)PCR,高保真PCR,熱啟動PCR,多重PCR等實驗應(yīng)用.高性能的pcr試劑盒 助您快速獲得高質(zhì)量PCR擴增結(jié)果.
產(chǎn)品型號:
所屬分類:PCR試劑盒
更新時間:2024-01-26
PCR試劑盒
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增巴斯德氏桿菌屬,與其他微生物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分
成分 | 編號 | 十孔盒包裝 |
PCR MagicMix 3.0 | 試劑一 | 1 mL(紅蓋) |
超純水 | 試劑二 | 1 mL(亮黃色) |
巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液 | 試劑三 | 100 μL(白蓋) |
巴斯德氏桿菌屬PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 試劑四 | 50 μL(黃蓋) |
核酸釋放劑(試用裝) | 試劑五 | 20 次(1 mL,綠蓋) |
使用手冊 | 試劑六 | 1 份 |
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:樣品 DNA。
PCR試劑盒使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網(wǎng)站訂購核酸釋放劑。
2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 補骨脂 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | N+2 個樣品管 | PCR 陰性對照 | PCR 陽性對照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
PCR 陰性對照(水) | -- | 18 μL | -- |
PCR 陽性對照(巴斯德氏桿菌屬PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液) | -- | -- | 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程 | 溫度 | 時間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應(yīng)(35 個循環(huán)) | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix在擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對照必須有預(yù)期條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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