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簡要描述:Super ECL Plus(超敏化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒) 產(chǎn)品貨號:S6009M產(chǎn)品規(guī)格:100 mL儲存條件:4℃密封避光保存,短期可放置于室溫。有效期見外包裝。
產(chǎn)品型號: S6009M
所屬分類:分子生物學(xué)
更新時間:2024-05-23
Super ECL Plus(超敏化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒)
產(chǎn)品貨號:S6009M
產(chǎn)品規(guī)格:100 mL
儲存條件:4℃密封避光保存,短期可放置于室溫。有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹:
Super ECL Plus 免疫印跡底物是增強型化學(xué)發(fā)光(ECL) 過氧化物酶的底物,可幫助用戶在免疫印跡分析過程中實現(xiàn) 低表達(dá)或高價值蛋白的檢測。 Super ECL Plus 底物可為使用辣根過氧化物酶(HRP)偶 聯(lián)物的免疫印跡實驗提供明亮的信號,對低表達(dá)或高價值蛋 白檢測靈敏度很高。該 ECL 底物能夠兼容各種膜、封閉液 和寬范圍抗體稀釋液,以出色性能、通用性和高性價比,滿 足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。 Super ECL Plus(超敏)特點: 1. 具有靈敏度:檢測硝化纖維素膜或 PVDF 膜上低表 達(dá)或高價值的蛋白條帶; 2. 長信號持續(xù)時間:條件優(yōu)化的情況下,經(jīng)底物孵育的印 跡條帶能夠持續(xù)輸出 6 至 8 h 的可檢測光信號; 3. 價格經(jīng)濟:配方經(jīng)過優(yōu)化,適用于濃度極低的抗體檢測。 • 0.2-1 μg/mL 一抗(或 1 mg/mL 的稀釋 1:1,000-1:5,000) • 10-50 ng/mL 二抗(或 1 mg/mL 的稀釋 1:20,000-1:100,000)
使用方法:
1. 執(zhí)行常規(guī) SDS-PAGE 電泳、轉(zhuǎn)膜和 Western Blot 步驟,1.0-0.2 μg/mL 一抗室溫孵育 1 h 或 4℃過夜,洗膜后,10-50 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。 2. Western Blot 最后一次洗膜時,新鮮配制發(fā)光工作液:分 別取等體積的溶液 A 和 B,混勻。 注:建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈 敏度略有降低。 3. 成像儀檢測:用鑷子取出 PVDF 膜置于成像儀檢測板上, 含蛋白面朝上,瀝干洗液但勿使膜干燥。將發(fā)光工作液 (0.125 mL 發(fā)光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使發(fā) 光液覆蓋 PVDF 膜,室溫孵育 3-5 min,參考儀器說明 書進(jìn)行檢測。 4. 壓片檢測:用鑷子取出 PVDF 膜置于保鮮膜上,含蛋白 面朝上,瀝干洗液但勿使膜干燥。將發(fā)光工作液(0.125 mL 發(fā)光工作液/cm2膜)滴加在 PVDF 膜上,使發(fā)光液覆蓋 PVDF 膜,室溫孵育 3-5 min,棄發(fā)光工作液,用保鮮 膜包好,將膜固定于片夾內(nèi),含蛋白面向上。暗室內(nèi)壓片 1 min,立即顯影,根據(jù)結(jié)果再調(diào)整壓片時間?;蚍謩e壓片 0.5、 1、3、5 min,然后一起顯影觀察結(jié)果。
注意事項:
1. 發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能有降低,操作 時注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2. 長時間曝光會加深背景;蛋白過量,會使條帶強弱變化失去線性關(guān)系;曝光不足,則條帶模糊或較淺。 3. 如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育 二抗,然后重新用 ECL 曝光。 4. 使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。 5. NaN3 會抑制 HRP 活性,回收二抗應(yīng)避免使用 NaN3,如 必需使用勿超過 0.01%。
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