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染料法熒光定量PCR試劑盒所用實時熒光定量技術解析

更新時間：2021-07-19　點擊量：4468
 　　染料法熒光定量PCR試劑盒通過對PCR擴增反應中的每一個循環(huán)產物熒光信號的實時監(jiān)測從而實現(xiàn)對起始模板的定性及定量分析。目前它主要通過兩種方式一熒光染料或者熒光標記的探針對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程，并結合相應的軟件對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
　　染料法熒光定量PCR試劑盒采用的實時熒光定量技術是生命科學領域的一項重要技術，是快速檢測基因表達水平的快捷方法，是一種在DNA擴增反應中，以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應循環(huán)后產物總量的方法，通過內參或者外參法對待樣品中的特定DNA序列進行定量的分析。高靈敏度、高重復性、高分辨率、動力學范圍廣，儀器穩(wěn)定性有保障，數據能夠比較真實的反映出樣品中RNA的相對含量變化。
　　染料法熒光定量PCR試劑盒產品特點：
　　1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
　　2. 根據TB 基因的保守序列設計引物，引物經過優(yōu)化，特異性高。
　　3. 采用了改良后的Taq Polymerase，具有高擴增效率，高擴增靈敏度，高擴增特異性的特點。
　　4. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
　　熒光染料法：在PCR反應體系中，加入過量熒光染料，該染料只與雙鏈DNA小溝結合，并不與單鏈DNA鏈結合，而且在游離狀態(tài)不發(fā)出熒光，只有摻入DNA雙鏈中才可以發(fā)光，因此，在PCR體系中，隨著特異性PCR產物的指數擴增，每個循環(huán)的延伸階段，染料摻入雙鏈DNA中，其熒光信號強度與PCR產物的數量呈正相關。