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白介素2Elisa試劑盒標本處理辦法

更新時間:2022-03-15 點擊量:2030
  白介素2Elisa試劑盒實驗原理:
  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中羊白細胞介素2(IL-2)水平。用純化的羊白細胞介素2(IL-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素2(IL-2),再與HRP標記的白細胞介素2(IL-2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素2(IL-2)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中羊白細胞介素2(IL-2)濃度。
  白介素2Elisa試劑盒注意事項:
  1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
  2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
  3.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
  5.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
  6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
  7.底物請避光保存。
  8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
  白介素2Elisa試劑盒標本處理辦法:
  實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mo/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
  若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
  使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引|入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。