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詳解探針法熒光定量PCR試劑盒檢測(cè)方法的局限性

更新時(shí)間:2023-02-24 點(diǎn)擊量:500
  探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,大程度地避免了非特異擴(kuò)增;反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,多個(gè)循環(huán)只需二十多分鐘;抗干擾的能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性好,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
  探針法熒光定量PCR試劑盒安全使用注意:
  使用前請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經(jīng)短暫離心后使用。
  所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;
  反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
  避免反復(fù)凍融,開啟后盡量在三個(gè)月內(nèi)使用完畢。
  試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;
  反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需I蓋緊;
  使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
  樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染。
  探針法熒光定量PCR試劑盒檢測(cè)方法的局限性:
  樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
  陽性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
  病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
  樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
  不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
  試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果。